Safety and Synovial Inflammatory Response After Intra-articular Injection of Botulinum Toxin Type A in Healthy Horses.

Botulinum toxin type A (BoNT-A) is a promising alternative for patients suffering from chronic joint pain. The aim of this study was to investigate whether a single injection of BoNT-A would produce adverse effects on clinical parameters and synovial parameters as well as lameness. One randomly selected radiocarpal joint was treated with 50 U of BoNT-A in eight horses, and the contralateral joint received saline solution. All horses received injections at day 0 and were re-evaluated twice daily for 7 days for heart rate (HR), respiratory rate (RR), rectal temperature (RT), mucous membrane color, capillary refill time, intestinal motility, appetite, water intake, defecation, urination, and attitude. At these same time points, joint pain and circumference were assessed. Objective lameness evaluations were performed once daily for 7 days and synovial fluid samples were collected at baseline, post-injection hour (PIH) 24 and PIH 168 and evaluated for synovial fluid parameters. HR and RT remained clinically unaltered, despite oscillations over time (P = .001). The remaining clinical parameters were unaltered by treatment or time (P > .05). Joint pain was not elicited by flexion and palpation in both limbs as well as carpal circumference was not altered (P = .88). Lameness was observed only on saline limbs. Cellular parameters evaluated in synovial fluid samples from both carpi had significantly increased from baseline to PIH 24, decreasing at PIH 168 (P < .05). It was concluded that the injection of 50 U BoNT-A is suggested to be a safe therapy for intra-articular use in horses and must be verified by further investigation.

Objective evaluation versus subjective evaluation of flexion tests in the pelvic limb of horses / Avaliação objetiva versus avaliação subjetiva dos testes de flexão no membro pélvico de cavalos

The agreement between subjective and objective evaluation methods was studied to identify claudication in the pelvic limbs of horses before and after flexion tests were performed. Twenty-nine horses were equipped with a wireless system of inertial sensors and evaluated during seven times while trotting. Videos were recorded to be evaluated by three veterinarians, with different levels of experience, to evaluate the agreement between the two different methods and between the evaluators. The evaluators and the objective evaluation had a low rate of agreement, with the exception of moderate agreement between the objective evaluation and evaluator 1 to identify lameness after the left total flexion and moderate agreement in evaluating the response to the tests, between objective evaluation and evaluator 2, after right distal flexion. This shows that there was a low agreement among the evaluators and between them and the objective evaluation for identifying lameness, measuring the degree of lameness and the response to the flexion tests.(AU)

A concordância entre métodos de avaliação subjetiva e objetiva foi estudada para identificar claudicação nos membros pélvicos antes e após a realização dos testes de flexão. Vinte e nove cavalos foram equipados com um sistema de sensores inerciais sem fio e avaliados durante sete momentos enquanto troteavam. Vídeos foram gravados para serem avaliados por três veterinários com diferentes níveis de experiência, a fim de avaliar a concordância entre os dois métodos diferentes e entre os avaliadores. Os avaliadores e a avaliação objetiva tiveram uma baixa taxa de concordância, com exceção de uma moderada concordância entre avaliação objetiva e avaliador 1 para identificar claudicação após o teste de flexão total esquerdo e uma moderada concordância na avaliação da resposta aos testes, entre avaliação objetiva e avaliador 2, após o teste de flexão distal direito. Isso demonstra que houve uma baixa concordância entre os avaliadores e entre estes e a avaliação objetiva para identificação da claudicação, mensuração do grau de claudicação e resposta aos testes de flexão.(AU)

Comparison of the effects of triamcinolone acetonide or platelet-rich plasma on expression of extracellular matrix-related genes in equine healthy chondrocytes in vitro / Comparação dos efeitos do acetonido de triancinolona ou plasma rico em plaquetas na expressão de genes relacionados à matriz extracelular de condrócitos in vitro de equinos adultos

ABSTRACT: In healthy cartilage, chondrocytes maintain an expression of collagens and proteoglycans and are sensitive to growth factors and cytokines that either enhance or reduce type II collagen synthesis. In osteoarthritis, pro-inflammatory cytokines, such as IL-6, induce overexpression of metalloproteinases (MMP) and decreasing synthesis of aggrecan. Use of chondroprotectors agents, such as Platelet-Rich Plasma (PRP) and triamcinolone (TA) are alternatives to reduce the progression of joint damage. In this study, we used chondrocytes extracted from metacarpophalangeal joints of healthy horses as the experimental model. Cells were treated in vitro with PRP or TA. No differences were observed between these treatments in comparison to the control group when the expressions of MMP9, MMP13, IL-6 and ACAN genes were evaluated (P<0.05). With these results, we can suggest that the treatments were not deleterious to equine cultured chondrocyte, once they did not stimulate MMPs and IL-6 synthesis or caused changes in ACAN.

RESUMO: Na cartilagem saudável, os condrócitos mantêm a expressão de colágenos e proteoglicanos, sendo sensíveis a fatores de crescimento e citocinas que aumentam ou reduzem a síntese de colágeno tipo II. Na osteoartrite, citocinas pró-inflamatórias, como a IL-6, estimulam a expressão de metaloproteinases (MMP) e reduzem a síntese de agrecano. O uso de condroprotetores, como o Plasma Rico em Plaquetas (PRP) e triancinolona (TA) é uma alternativa para se reduzir a progressão do dano articular. Neste estudo foram usados condrócitos extraídos das articulações metacarpofalangeanas de equinos saudáveis. As células foram tratadas in vitro com TA ou PRP. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos comparando-se com o grupo controle quanto à expressão genética de MMP-9, MMP-13, IL-6 e ACAN (p<0,05). Assim, pode-se sugerir que os tratamentos não foram deletérios ao cultivo de condrócitos, uma vez que não estimularam a síntese de MMP e IL-6 e nem causaram alterações no ACAN.

Can Triamcinolone acetonide, platelet-rich plasma, and pentosan polysulfate sodium induce oxidative stress in cultured equine chondrocytes? / Acetonido de triancinolona, plasma rico em plaquetas e pentosano polissulfato sódico podem ocasionar estresse oxidativo em cultivo de condrócitos de equinos?

ABSTRACT: Progressive deterioration and loss of articular cartilage are the final degenerative events common to osteoarthritis (OA). Reactive oxygen species (ROS) play an important role in this chondrocyte catabolic activity, leading to cell death and matrix components breakdown. Intra-articular corticosteroid injections such as triamcinolone acetonide have been used to control pain and inflammation associated with OA. New treatments for OA, platelet-rich plasma and pentosan polysulphate sodium have also been used and further investigations are necessary to determine their safety in joint cells. In this in vitro study, the use of these three substances (triamcinolone acetonide, platelet-rich plasma, and pentosan polysulphate sodium) in healthy chondrocytes did not alter the antioxidant status when compared to control groups, indicating that they could be considered safe in healthy conditions.

RESUMO: A deterioração progressiva e perda da cartilagem articular são os eventos finais da osteoartrite (OA). Espécies reativas de oxigênio (ROS) têm papel importante na atividade catabólica de condrócitos, levando a morte celular e quebra dos componentes da matriz. Injeções intra-articulares de corticosteroides, como com o acetonido de triancinolona, são usadas para controle da dor e inflamação associadas à OA. Novos tratamentos para a OA, como o plasma rico em plaquetas e o pentosano polissulfato sódico, também tem sido utilizados e necessitam de maiores investigações para determinar sua segurança para as células articulares de equinos. Neste estudo in vitro, o uso destas três substâncias (acetonido de triancinolona, pentosan polissulfato de sódio de plasma rico em plaquetas) em condrócitos saudáveis de equinos não alterou o status antioxidante quando comparado aos grupos controle, indicando que puderam ser considerados seguros em condições saudáveis.

Anesthetic recovery assisted by rope at three points in horses / Recuperação anestésica assistida por corda em três pontos em equinos

ABSTRACT: This study evaluated the quality of anesthesyc recovery of horses using a three-point assisted method. Sixty-eight horses (37 females and 31 males) of different breeds, age and weight submitted to general anesthesia for abdominal - ABD (n=15), arthroscopy - ART (n=17), other orthopedic - ORT (n=18) and miscellaneous - MIX (n=18) surgical procedures. Isoflurane resulted in shorter recovery time (67.4±25.7min) compared to halothane (88.0±37.8min). The mean duration (±SD) of anesthesia for ABD, ORT, ART and MIXgroups was 166.7 (±14), 54.9 (±5.9), 86.5 (±7.3) and 76.4 (±32.5) minutes (min) respectively. Quality of recovery wasn't influenced by duration of anesthesia or by use of analgesic, sedative and/or anesthetic drugs or not (p>0.05). Mean standing time (TEst) during anesthetic recovery was 67.5 (±29.9) min in ABD, 44.4 (±27) min in ORT, 42.2 (±23.2) min in ART and 39 (±14.7) min in MIX group. Average number of attempts (Ast) to stand was 1.8 (±0.8) in ABD group, 3.1 (±4.7) in ORT, 1.8 (±1.2) in ART and 1.8 (±1.2) in MIX. Recovery time (TRec) in ABD group was 102.2 (±36.5) min, ORT 70.1 (±36.5) min, ART 72.2 (±24.8) min and MIX group 66.6 (±19.1) min. TRec differed (p<0.05) between ABDand other groups. Three-point assisted recoveryfrom anesthesia showed to be a safe procedure during horses' recovery. This method is easy to apply and well tolerated by horses regardless of the surgical procedure.

RESUMO: Neste estudo foi avaliado a qualidade da recuperação anestésica de equinos através do método de recuperação assistida por três pontos. Sessenta e oito cavalos (37 fêmeas e 31 machos) de diferentes raças, idade e peso foram submetidos à anestesia geral para cirurgias abdominais - ABD (n=15), artroscopias - ART (n=17), demais cirurgias ortopédicas - ORT (n=18) e mistas - MIX (n=18). As anestesias realizadas com isofluorano resultaram em menor tempo de recuperação (67.4±25.7min), comparadas com as anestesias realizadas com halotano (88.0±37.8min). A média da duração (±SD) da anestesia nos grupos ABD, ORT, ART e MIX foi de 166.7 (±14), 54.9 (±5.9), 86.5 (±7.3) e 76.4 (±32.5) minutos (min) respectivamente. A qualidade da recuperação não foi influenciada pelo tempo de anestesia ou pelo uso de analgésicos, sedativos e/ou outras drogas anestésicas (p>0.05). A média do tempo para estação (TEst) durante a recuperação anestésica foi de 67.5 (±29.9) min em ABD, 44.4 (±27) min em ORT, 42.2 (±23.2) min em ART e 39 (±14.7) min em MIX. O tempo de recuperação (TRec) em ABD foi de 102.2 (±36.5) min, ORT 70.1 (±36.5) min, ART 72.2 (±24.8) min e MIX 66.6 (±19.1) min. O TRec diferiu (p<0.05) entre o grupo de cirurgias ABD e os demais. O método de recuperação anestésica por três pontos mostrou ser seguro em cavalos, sendo facilmente aplicável e bem tolerado por cavalos após diferentes procedimentos cirúrgicos.

Prevalência de alterações ósseas no tarso de potros Crioulos de até vinte e seis meses de idade / Bone changes prevalence in the tarsus of Crioulo yearlings up to 26 months of age

Com o objetivo de definir a prevalência de alterações ósseas no tarso, foram examinados radiograficamente 77 potros da raça Crioula, com até 26 meses de idade e a relação das lesões com parâmetros biométricos e de manejo. Os animais foram divididos em dois grupos por idade: G1, incluindo potros de nove a 18 meses (34/77); e G2, com animais de 19 a 26 meses (43/77). Os animais também foram divididos pelo tempo de preparo para exposição morfológica em GC, grupo controle (29/77), os animais sem preparo para exposição; e GI, grupo incentivo (48/77), animais com preparo médio de 4,55 meses, e foram separados por sexo em machos (46/77) e fêmeas (31/77). Os dados foram coletados em 24 propriedades de criação ou centros de treinamento/preparo do estado do Rio Grande do Sul. Lesões radiograficamente visíveis foram observadas em 79,2% (61/77) dos animais, 80,4% dos machos, 77,4% das fêmeas, 77,3% dos animais do GC, 79,2% dos animais do GI, 86,7% dos animais do G1 e 76,7% dos animais do G2. O peso médio dos potros de 10 a 12 meses de idade foi 293,2kg, representando 71,3% do peso adulto; o peso médio dos animais com idade de 19 a 26 meses foi de 360,5kg (87,6% do peso adulto); do GC foi de 288,9kg (70,2% do peso adulto); e do GI 341,9kg (83,1% do peso adulto), apesar da idade média dos dois últimos grupos ter sido de apenas 16,8 e 19,0 meses, respectivamente. Observou-se relação positiva entre o aumento do escore corporal dos animais (P=0,01; r=0,3), do tempo de preparo dos animais para exposição morfológica (P=0,0001; r=0,7) e do escore de deposição de gordura na crista do pescoço (P=0,02; r=0,3) com as lesões radiográficas observadas no tarso dos potros. Vários fatores podem estar envolvidos na osteoartrite társica distal, entretanto, em cavalos Crioulos, o fator mais importante presente nas criações foi o sobrepeso.

Aiming to evaluate the prevalence of bone changes, radiographs were taken from both tarsal joints of 77 Crioulo yearlings, up to 26 months of age. The degree of changes was correlated with biometric parameters and management practices. The animals were separated into six groups, according to age: G1, including nine to 18 months old foals (34/77) and G2, with animals between 19 to 26 months of age (43/77); preparation time to halter class shows: GC, including animals who were not submitted to any preparation (29/77), and GI, consisting of young horses prepared to participate (average of 4.55 months of preparation time) in halter shows (48/77); and gender: colts (46/77) and fillies (31/77). Data were obtained from 24 breeding farms or training centers in Rio Grande do Sul state. Results showed that 79.22% (61/77) of the animals presented some degree of radiographically visible lesions, being 80.4% of males, 77.4% of females, 77.3% in GC, 79.2% in GI, 86.7% in G1 and 76.7% in G2. The mean body weight of the 10 to 12 month old yearlings (G1) was 293.2kg, representing 71.3% of the breed's mature weight and that of the 19 to 26 month old (G2) animals was 360.5kg (87.6% of the mature weight). The mean body weight of the GC was 288.9kg (70.2% of the mature weight) and of GI was 341.9kg (83.1% of the mature weight), although the average age of both groups was 16.8 and 19.0 months, respectively. A significant relationship was found between the animal's body condition score (P=0.01; r=0.3), time of preparation to halter class shows (P=0.0001; r=0.7), and neck crest score (P=0.02; r=0.3), and degree of the radiographic lesions found in the tarsi. Several factors can be involved in the development of distal tarsal juvenile osteoarthritis; however, in Crioulo breeding farms, the most important factor present was the horse's overweight.

Laminite crônica em equídeos da raça Crioula: características clínicas e radiográficas / Chronic laminitis in Criollo horses: clinical and radiographic characteristics

Este estudo visou analisar o perfil clínico e radiológico de cavalos crioulos com laminite crônica internados na Clínica de Equinos no período de 2010 a 2011. A partir das fichas de registro, avaliações clínicas diárias e estudos radiográficos, foram computados nove equinos, cinco fêmeas e quatro machos, com idade média de 8,6±5,9 anos e período médio de internação de 104,2±91,7 dias. As fêmeas representaram 55,6% (5/9) da casuística, enquanto os machos inteiros representaram 44,4% (4/9); 22,2% (2/9) dos animais apresentaram laminite nos quatro membros, enquanto 77,8% (7/9) apresentaram laminite apenas nos membros anteriores. Quanto às causas da laminite, 11,1% foram decorrentes de endotoxemia (1/9), 44,4% (4/9) de síndrome metabólica equina e, em 44,4% (4/9), não foi possível determinar a origem. Afundamento ≥20mm da terceira falange ocorreu em 66,7% (6/9) dos animais. Apenas 11,1% (1/9) dos animais apresentaram afundamento distal unilateral. Não houve correlação entre o afundamento da coluna óssea e o grau de claudicação. Dos nove animais deste estudo, 66,7% (6/9) apresentaram rotação ≥5.5° em pelo menos um dos membros. Quanto maior o grau de rotação, maior o grau de claudicação (0.1≤r<0.5; P<0.05). Dois pacientes (22,2%) foram submetidos à tenotomia do flexor digital profundo. A resistência à insulina foi a causa predisponente a laminite mais comum neste estudo. As terapias de suporte, cuidados intensivos de enfermagem, casqueamento e ferrageamento corretivos resultaram em alta taxa de sobrevivência, permitindo que, após a alta, os animais pudessem ser mantidos com conforto sem uso de medicação.

This study aimed to analyze the clinical and radiographic profile of Criollo horses affected by chronic laminitis brought to the Equine Clinic between 2010 and 2011. Medical records, daily clinical evaluations and radiographic studies were analyzed. Data of nine horses, 55.6% (5/9) females and 44.4% (4/9) intact males with a mean age 8.6±5.9 years and 104.2±91.7 days of hospitalization were included. Laminitis occurred on all four limbs on 22.2% (2/9), while 77.8% (7/9) occurred only on the forelimbs. One out of nine cases laminites was due to endotoxemia (11.1%), 44.4% (4/9) was related to equine metabolic syndrome and on 44.4% (4/9) the cause could not be determined. Sinking of third phalanx ≥20mm identified on radiographic studies occurred on 66.7% (6/9) horses. Only 11.1% (1/9) of the animals presented unilateral sinking of the third phalanx. Sinking of the third phalanx was not correlated with the degree of lameness. Rotation of the distal phalanx (≥5.5°) on at least one member was observed in 66.7% (6/9). There was a positive correlation of the third phalanx rotation degree and the lameness degree (0.1≤r<0.5; P<0.05). Two patients (22.2%) required tenotomy of the deep digital flexor tendon. Insulin resistance was the predisposing cause laminitis most common in this study. Supportive therapy, intensive nursing care, corrective trimming and shoeing provided a high survival rate after discharge so that the animals could be kept comfortable without pain medication.

Avaliação de sete protocolos para obtenção de plasma rico em plaquetas na espécie equina / Evaluation of seven platelet-rich plasma processing protocols in the equine species

O presente estudo teve por objetivo avaliar a capacidade de concentração plaquetária e sua correlação com os níveis do fator de crescimento TGF-B1, a presença de leucócitos e de hemácias nos diferentes protocolos utilizados na obtenção do plasma rico em plaquetas (PRP) de equinos, através do método manual. Dez equinos, sadios, com idade média de 7 anos (±2,39), pesando em média 500kg (±67,1) foram utilizados neste estudo. Os protocolos testados variaram na velocidade e no tempo nas duas centrifugações. As variáveis analisadas nas amostras de PRP foram: concentração de plaquetas, presença de leucócitos e hemácias, e níveis de TGF-β1 quantificados pelo teste ELISA. Os protocolos testados não diferiram na capacidade de concentração de plaquetas e nos níveis de TGF-β1. Entretanto, houve diferença significava entre o protocolo I e os demais por este apresentar maior número de hemácias e leucócitos nas amostras de PRP, sendo por esse motivo considerado um protocolo inadequado para processamento do volume de sangue utilizado. Os demais protocolos podem ser utilizados para obtenção de PRP terapêutico em equinos.

PRP is plasma that contains a high numbers of platelets and growth factors in a small volume. The aim of this study was to evaluate seven different protocols to obtain PRP by the manual method according to their capacity to concentrate platelets, leukocyte and erythrocyte contamination and correlation between platelet count and TGF-β1 growth factor levels in PRP samples. Ten healthy horses with a mean age of 7 years (±2.39), weighing on average 500 kg (±67.1) were used in this study. The protocols tested varied according to the speed and time used at the two centrifugations. PRP samples were analyzed regarding platelet concentration, leukocyte and erythrocyte contamination and TGF-β1 levels quantified by ELISA. No significant differences among protocols were observed regarding the ability to concentrate platelets and TGF-β1. However, protocol I showed significantly higher erythrocyte and leukocyte counts in PRP samples than the other protocols, reason why it was considered inadequate for the volume of blood processed in this experiment. The remaining protocols are suitable for extracting PRP.

Frequência de problemas de equilíbrio nos cascos de cavalos crioulos em treinamento / Frequency of hoof balance problems in training crioulo horses

O desequilíbrio dos cascos como fator causador de claudicação em cavalos atletas é bastante documentado na literatura e pode ser dividido em geométrico, dinâmico e natural. O presente estudo verificou o equilíbrio geométrico nos cascos de 97 cavalos crioulos adultos, em treinamento, em 16 estabelecimentos, para determinar a incidência de alterações nos cascos. Foram registradas nove medidas nos cascos dos membros anteriores: ângulo da pinça, circunferência na banda coronária, comprimento lateral e medial dos talões e quartos, comprimento da pinça, comprimento e largura da ranilha. As mensurações permitiram a identificação das seguintes alterações: 85 dos 97 cavalos (87.62%) apresentaram talões contraídos, 48 (49.48%) desequilíbrio médio-lateral, 23 (23.71%) ângulos dos cascos contralaterais diferentes e 11 (11.34%) tinham o eixo quebrado para trás. A incidência de ângulos dos cascos contralaterais diferentes variou entre os cinco grupos de idade (p<0.05). O ângulo do casco variou entre 45° e 58° (52.71 ± 0.15°). O comprimento médio da pinça foi 8.7 ± 0.6 cm e foi considerado excessivo para cavalos com 411.4 ± 34.80 kg de peso. A grande freqüência de alterações de casco nesta população de cavalos sugere que as práticas de casqueamento e ferrageamento adotadas devem ser revistas e melhoradas.

The role of improper hoof balance causing lameness in sport horses is well documented in the literature. Hoof balance can be divided into geometric, dynamic and natural balance. This study assessed the geometric balance of 97 adult Crioulo horses in training at 16 different training centers to determine the incidence of poor hoof conformation. Nine measurements of the hoof were taken: angle at the toe, circumference at the coronary band, lateral and medial quarter and heel length, toe length, frog length and width. From these measurements the following hoof problems could be identified: 85 out of 97 horses (87.62%) had contracted heels, 48 (49.48%) had medial to lateral hoof imbalance, 23 (23.71 %) had mismatched hoof angles and 11 (11.34%) had a broken back hoof axis. The frequency of mismatched hoof angles was different between the five age groups (p<0.05). The hoof angle varied from 45° to 58° (52.71 ± 0.15°). The average toe length was 8.7 ± 0.6 cm and was considered to be excessive for horses with 411.4 ± 34.80 Kg body weight. The high frequency of hoof abnormalities in this population of horses suggests that trimming and shoeing practices employed should be reviewed and improved.